Зарегистрированные участники должны соблюдать ряд правил. До места старта (площадь перед Центром семьи «Казан») участники добираются самостоятельно. Участники формируют колонну, движение которой организуют представители органов правопорядка.
Всех велосипедистов просят строго следовать правилам дорожного движения. Согласно ПДД движение по проезжей части на велосипедах разрешается лицам, достигшим 14-летнего возраста. Лицам до 14 лет выезд на проезжую часть запрещен даже в сопровождении взрослого, вследствие чего участие детей в «Велоночи» не представляется возможным.
Категорически запрещено употребление алкоголя. Кроме того, организаторы заявляют, что участниками мероприятия считаются те, кто неукоснительно соблюдает правила: требуется наличие шлема, велозамка, фонарика, яркой одежды со светоотражающими элементами. Также участникам понадобится FM-приемник или другой гаджет с радиовещанием - по дороге участники прослушают мини-лекции о Казани.